“十二五”863計(jì)劃生物和醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域“基于DNA條形碼的快速檢測(cè)與分類關(guān)鍵技術(shù)”主題項(xiàng)目于2012年初正式啟動(dòng)。該項(xiàng)目選擇我國珍稀藥用物種資源、野生物種資源、主要農(nóng)作物資源和環(huán)境指示型生物等為研究對(duì)象,研制DNA條形碼檢測(cè)技術(shù)和相關(guān)試劑產(chǎn)品,構(gòu)建上述生物物種的基因條形碼標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)庫,建立我國重要生物遺傳資源的DNA條形碼網(wǎng)絡(luò)服務(wù)體系及基于DNA條形碼技術(shù)的快速檢測(cè)方法和分類平臺(tái),對(duì)保護(hù)我國重要物種資源、監(jiān)測(cè)農(nóng)業(yè)和森林環(huán)境系統(tǒng)、防止珍貴物種資源流失及外來物種入侵等具有重要意義。
項(xiàng)目實(shí)施一年來,各項(xiàng)研究任務(wù)按計(jì)劃有序推進(jìn)。目前,項(xiàng)目已經(jīng)組織了100多人次的野外考察研究,針對(duì)淡水、森林和農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)開展了樣品采集和保藏工作,獲取各類樣品達(dá)5097份。為了滿足大規(guī)模樣品DNA測(cè)序的需求,項(xiàng)目研究人員針對(duì)GFF法提取DNA的實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行了大量探索,實(shí)現(xiàn)了高通量、低成本、高質(zhì)量的DNA提取技術(shù),實(shí)驗(yàn)室的年標(biāo)本處理能力將達(dá)到2萬條;同時(shí),還建立了ITS2+psbA-trnH、COI為主,matK、rbcL和ITS2為輔的樣品快速PCR擴(kuò)增技術(shù)體系以及基于二代測(cè)序?yàn)橹鞯暮A緿NA條形碼數(shù)據(jù)獲得技術(shù)體系,為基因條形碼標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)庫的構(gòu)建奠定了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。針對(duì)國內(nèi)中藥材市場(chǎng)上冬蟲夏草存在偽品現(xiàn)象,項(xiàng)目開展了DNA條形碼技術(shù)快速鑒別冬蟲夏草及其混偽品、近緣物種的技術(shù)研究,研究結(jié)果顯示,應(yīng)用BLAST1和Nearest genetic distance兩種方法ITS條形碼的鑒定效率可達(dá)100%,能快速有效區(qū)分冬蟲夏草與其混偽品和近緣種。此項(xiàng)技術(shù)的推廣將有利于我國冬蟲夏草等珍稀中藥材市場(chǎng)的規(guī)范化建設(shè)和貿(mào)易監(jiān)管,具有很高的示范應(yīng)用價(jià)值。
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